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Viroma

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Viroma se refiere al conjunto de virus[1][2]​ que a menudo se investiga y describe mediante la secuenciación metagenómica de ácidos nucleicos virales[3]​ que se encuentran asociados con un ecosistema, organismo u holobionte en particular. La palabra se usa con frecuencia para describir los metagenomas virales de escopeta ambientales. Los virus, incluidos los bacteriófagos, se encuentran en todos los entornos, y los estudios del viroma han proporcionado información sobre el ciclo de los nutrientes,[4][5]​ desarrollo de la inmunidad,[6]​ y una fuente importante de genes a través de la conversión lisogénica.[7]

Historia

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Los primeros estudios exhaustivos de viromas se realizaron mediante secuenciación comunitaria de escopeta,[8]​ que con frecuencia se denomina metagenómica. En la década de 2000, el laboratorio Rohwer secuenció viromas de agua de mar,[9]​ sedimentos marinos,[10]​ heces humanas adultas,[11]​ heces humanas infantiles,[12]​ tierra,[13]​ y sangre.[14]​ Este grupo también realizó el primer viroma de ARN con colaboradores del Instituto Genómico de Singapur.[15]​ A partir de estos primeros trabajos, se concluyó que la mayor parte de la diversidad genómica está contenida en el viroma global y que la mayor parte de esta diversidad permanece sin caracterizar.[16]​ Este punto de vista fue apoyado por el proyecto de secuenciación genómica individual, en particular el fago de mycobacterium.[17]

Métodos de estudio

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Para estudiar el viroma, las partículas similares a virus se separan de los componentes celulares, generalmente mediante una combinación de filtración, centrifugación de densidad y tratamientos enzimáticos para eliminar los ácidos nucleicos libres.[18]​ A continuación, los ácidos nucleicos se secuencian y analizan utilizando métodos metagenómicos . Alternativamente, existen métodos computacionales recientes que utilizan secuencias ensambladas directamente metagenómicas para descubrir virus.[19]

Global Ocean Viromes (GOV) es un conjunto de datos que consiste en una secuenciación profunda de más de 150 muestras recolectadas en los océanos del mundo en dos períodos de estudio por un equipo internacional.[20]

Anfitriones de virus

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Podemos determinar el metagenoma huésped a partir de la secuencia de identidad del profago.

Los virus son las entidades biológicas más abundantes en la Tierra, pero los desafíos para detectar, aislar y clasificar virus desconocidos han impedido realizar estudios exhaustivos del viroma global.[21]​ Se utilizaron más de 5 Tb de datos de secuencia metagenómica de 3.042 muestras geográficamente diversas para evaluar la distribución global, la diversidad filogenética y la especificidad del hospedador de los virus.

Proporción de 18 470 virus conectados con huéspedes predichos en varios niveles taxonómicos.

En agosto de 2016, más de 125.000 genomas virales de ADN parcial, incluido el fago más grande identificado hasta ahora, aumentaron 16 veces el número de genes virales conocidos.[21]​ Se utilizó un conjunto de métodos computacionales para identificar las conexiones putativas del virus huésped. La información del hospedador viral aislado se proyectó en un grupo, lo que resultó en asignaciones de hospedador para el 2,4% de los grupos virales.

Luego, el sistema inmunológico procariótico CRISPR-Cas que contiene una "biblioteca" de fragmentos del genoma de los fagos (proto-espaciadores) que han infectado previamente al huésped.[21]​ Se identificaron espaciadores de genomas microbianos aislados con coincidencias con contigs virales metagenómicos (mVC) para el 4,4% de los grupos virales y el 1,7% de los únicos. Se exploró la hipótesis de que los genes de ARN de transferencia viral (ARNt) se originan en su anfitrión.

Los ARNt virales identificados en el 7,6% de las mVC se emparejaron para aislar genomas de una sola especie o género.[21]​ La especificidad de la asignación viral del hospedador basada en ARNt fue confirmada por coincidencias de espaciador CRISPR-Cas que muestran una concordancia del 94% en el ámbito de género. Estos enfoques identificaron 9.992 asociaciones putativas de virus-huésped que permiten la asignación de huéspedes al 7,7% de las mVC. La mayoría de estas conexiones eran previamente desconocidas e incluyen huéspedes de 16 filos procariotas para los que no se han identificado virus previamente.

Tres protoespaciadores codificados en mVC identificados en muestras metagenómicas orales humanas que se vincularon a espaciadores CRISPR de huéspedes de distintos filos, Actinomycetes sp. taxón oral 180 (Actinobacteria) y Streptococcus plurextorum DSM 22810 (Firmicutes).

Muchos virus se especializan en infectar hospedadores relacionados.[21]​ Es posible que existan generalistas virales que infectan a huéspedes de diferentes órdenes taxonómicos. La mayoría de las coincidencias de espaciadores CRISPR fueron de secuencias virales a huéspedes dentro de una especie o género. Algunos mVC se vincularon a múltiples huéspedes de taxones superiores. Un grupo viral compuesto por macs de muestras orales humanas contenía tres foto-espaciadores distintos con coincidencias casi exactas con los espaciadores en Actionbacteria y Firmicutes.

Para enero de 2017, el sistema IMG/VR,[22]​ la base de datos de virus pública interactiva más grande, contenía 265.000 secuencias virales metagenómicas y virus aislados. Este número aumentó a más de 760.000 en noviembre de 2018 (IMG/VR v.2.0).[23]​ Los sistemas IMG/VR sirven como punto de partida para el análisis de secuencia de fragmentos virales derivados de muestras metagenómicas.

Referencias

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  1. Anderson, Norman G; Gerin, John L; Anderson, N Leigh (2003). «Global Screening for Human Viral Pathogens.». Emerging Infectious Diseases 9 (7): 768-773. PMC 3023425. PMID 12890315. doi:10.3201/eid0907.030004. 
  2. Zárate, S; Taboada, B; Yocupicio-Monroy, M; Arias, CF (2017). «Human Virome.». Archives of Medical Research 48 (8): 701-716. doi:10.1016/j.arcmed.2018.01.005. 
  3. McDaniel, L; Breitbart, M; Mobberley, J; Long, A; Haynes, M; Rohwer, F; Paul, JH (23 de septiembre de 2008). «Metagenomic analysis of lysogeny in Tampa Bay: implications for prophage gene expression.». PLOS ONE 3 (9): e3263. PMC 2533394. PMID 18810270. doi:10.1371/journal.pone.0003263. 
  4. Wilhelm, Steven W.; Suttle, Curtis A. (1999). «Viruses and Nutrient Cycles in the Sea». BioScience 49 (10): 781-788. ISSN 1525-3244. doi:10.2307/1313569. 
  5. Wegley, L; Edwards, R; Rodriguez-Brito, B; Liu, H; Rohwer, F (November 2007). «Metagenomic analysis of the microbial community associated with the coral Porites astreoides.». Environmental Microbiology 9 (11): 2707-19. PMID 17922755. doi:10.1111/j.1462-2920.2007.01383.x. 
  6. Barr, JJ; Auro, R; Furlan, M; Whiteson, KL; Erb, ML; Pogliano, J; Stotland, A; Wolkowicz, R et al. (25 de junio de 2013). «Bacteriophage adhering to mucus provide a non-host-derived immunity.». Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 110 (26): 10771-6. PMC 3696810. PMID 23690590. doi:10.1073/pnas.1305923110. 
  7. Sharon, I; Battchikova, N; Aro, EM; Giglione, C; Meinnel, T; Glaser, F; Pinter, RY; Breitbart, M et al. (July 2011). «Comparative metagenomics of microbial traits within oceanic viral communities.». The ISME Journal 5 (7): 1178-90. PMC 3146289. PMID 21307954. doi:10.1038/ismej.2011.2. 
  8. Breitbart, M; Salamon, P; Andresen, B; Mahaffy, JM; Segall, AM; Mead, D; Azam, F; Rohwer, F (29 de octubre de 2002). «Genomic analysis of uncultured marine viral communities.». Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 99 (22): 14250-5. PMC 137870. PMID 12384570. doi:10.1073/pnas.202488399. 
  9. Angly, FE; Felts, B; Breitbart, M; Salamon, P; Edwards, RA; Carlson, C; Chan, AM; Haynes, M et al. (November 2006). «The marine viromes of four oceanic regions.». PLOS Biology 4 (11): e368. PMC 1634881. PMID 17090214. doi:10.1371/journal.pbio.0040368. 
  10. Breitbart, M; Felts, B; Kelley, S; Mahaffy, JM; Nulton, J; Salamon, P; Rohwer, F (22 de marzo de 2004). «Diversity and population structure of a near-shore marine-sediment viral community.». Proceedings of the Royal Society B: Biological Sciences 271 (1539): 565-74. PMC 1691639. PMID 15156913. doi:10.1098/rspb.2003.2628. 
  11. Breitbart, M; Hewson, I; Felts, B; Mahaffy, JM; Nulton, J; Salamon, P; Rohwer, F (October 2003). «Metagenomic analyses of an uncultured viral community from human feces.». Journal of Bacteriology 185 (20): 6220-3. PMC 225035. PMID 14526037. doi:10.1128/jb.185.20.6220-6223.2003. 
  12. Breitbart, M; Haynes, M; Kelley, S; Angly, F; Edwards, RA; Felts, B; Mahaffy, JM; Mueller, J et al. (June 2008). «Viral diversity and dynamics in an infant gut.». Research in Microbiology 159 (5): 367-73. PMID 18541415. doi:10.1016/j.resmic.2008.04.006. 
  13. Fierer, N; Breitbart, M; Nulton, J; Salamon, P; Lozupone, C; Jones, R; Robeson, M; Edwards, RA et al. (November 2007). «Metagenomic and small-subunit rRNA analyses reveal the genetic diversity of bacteria, archaea, fungi, and viruses in soil.». Applied and Environmental Microbiology 73 (21): 7059-66. PMC 2074941. PMID 17827313. doi:10.1128/aem.00358-07. 
  14. Breitbart, M; Rohwer, F (November 2005). «Method for discovering novel DNA viruses in blood using viral particle selection and shotgun sequencing.». BioTechniques 39 (5): 729-36. PMID 16312220. doi:10.2144/000112019. 
  15. Zhang, T; Breitbart, M; Lee, WH; Run, JQ; Wei, CL; Soh, SW; Hibberd, ML; Liu, ET et al. (January 2006). «RNA viral community in human feces: prevalence of plant pathogenic viruses.». PLOS Biology 4 (1): e3. PMC 1310650. PMID 16336043. doi:10.1371/journal.pbio.0040003. 
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  18. Thurber, RV; Haynes, M; Breitbart, M; Wegley, L; Rohwer, F (2009). «Laboratory procedures to generate viral metagenomes.». Nature Protocols 4 (4): 470-83. PMID 19300441. doi:10.1038/nprot.2009.10. 
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  20. Tang, Lei (July 2019). «Pole-to-pole ocean viromes». Nature Methods (Paper) 16: 575. doi:10.1038/s41592-019-0480-1.  – via Springer Nature (requiere suscripción)
  21. a b c d e «Uncovering Earth's virome». Nature 536 (7617): 425-30. August 2016. PMID 27533034. doi:10.1038/nature19094. 
  22. «IMG/VR: a database of cultured and uncultured DNA Viruses and retroviruses». Nucleic Acids Res. 45 (D1): D457-D465. January 2017. PMC 5210529. PMID 27799466. doi:10.1093/nar/gkw1030. 
  23. «IMG/VR v.2.0: an integrated data management and analysis system for cultivated and environmental viral genomes». Nucleic Acids Res. 47 (Database issue): D678-D686. 2019. PMC 6323928. PMID 30407573. doi:10.1093/nar/gky1127.